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【摘要】 目的 建立化疗药物使白细胞（WBC）减少的动物模型，为富氧矿素提高实验动物WBC作用的评价方法提供科学依据。方法 用环磷酰胺（cyclophosvnamide，cy）灌胃（100mg/kg）,隔天1次，连续5次，造成实验小鼠WBC下降的动物模型，通过不同实验组用药前后WBC的变化，以评价富氧矿素高、低（相当人用量的2、10倍）剂量组是否能提高WBC数量。结果 富氧矿素低剂量组与模型组比较，P<0.01，差异有非常显著性；富氧矿素高剂量组与模型组比较，P<0.01，差异有非常显著性。结论 富氧矿素能提高实验小鼠WBC的数量。
【关键词】 富氧矿素；WBC；环磷酰胺；动物模型
Protective effects and the mechanism of CELLAID on leucopenia induced by Cyclophosphamide in mice
LI Yu-hu,MIAO Zhu-lei, ZHANG Hui,et al.Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai 201203,China
【Abstract】 Objective To establish leucopenia mouse model induced by chemotherapeutics and provide scientific basis for evaluation of CELLAID enhancing the effect of WBC on animal models.Methods Intragastric administration of Cyclophosphamide （100mg/kg） was given to mice every other day for five times to establish leucopenia model. The effect of high and low dosage of CELLAID was evaluated before and after treatment.Results There were significantly differences between CELLAID high and low-dose groups and model group （P<0.01）. Conclusion CELLAID can enhance the amount of WBC in mouse.
【Key words】 CELLAID；WBC；cyclophosphamide；animal model
环磷酰胺是一种临床上广泛应用的抗癌药, 同时又是一种免疫抑制剂。用环磷酰胺处理的动物常作为免疫缺陷或免疫功能低下的动物模型［1，2］。
对于肿瘤患者来说,化疗或放疗是最基本的治疗方法,但由此可带来骨髓抑制,白细胞减少,血红蛋白降低等副作用又是不可避免的。本实验证明富氧矿素（口服液）对正常动物接受化疗药环磷酰胺所致外周血白细胞降低有显著的对抗作用，这对肿瘤病人化疗后免疫功能的恢复是非常重要的。这一结果为富氧矿素用于治疗造血及免疫功能低下疾病提供理论依据，为富氧矿素临床应用奠定坚实的基础。
本次实验以小鼠白细胞数量为观察指标，以评价富氧矿素提高WBC的作用。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 动物 KM小鼠，50只，雌雄各半，体重（18±1）g，清洁级动物，中科院上海实验动物中心提供，合格证：scxk（沪）2007-0005。
1.1.2 实验室气象条件 温度22℃～25℃，湿度40%～70%。
1.1.3 试剂与仪器 （1）环磷酰胺（cyclophosvnamide，cy），江苏恒瑞医药股份有限公司生产，批号07041721。（2）富氧矿素CELLAID（赛鼎TM膳食营养补充剂），美国泰尔林健康技术有限公司生产，批号121006。（3）全自动血液分析仪，型号：XE-2100。
1.2 造模方法与药物干预
1.2.1 分组 50只KM小鼠随机均分为4组，每组12只，雌、雄各半。（1）正常饲养组：不灌胃，对照组。（2）模型组：0.9%NaCl灌胃体积1ml，环磷酰胺（灌胃）100mg／kg。（3）低剂量富氧矿素：40mg/kg，相当人用量的2倍＋环磷酰胺100mg／kg。（4）高剂量富氧矿素：200mg/kg，相当人用量的10倍＋环磷酰胺100mg／kg。
1.2.2 实验过程 上述各组分别进行称重,按设计剂量进行灌胃。环磷酰胺灌胃时间安排在第1、3、5、7、9天上午，富氧矿素灌胃时间安排在第1～14天下午。第15天各组称体重，采血，送实验室检测WBC。
1.2.3 观察项目 （1）小鼠体重变化；（2）小鼠血液白细胞的变化。
1.3 统计学方法 实验数据以x±s表示,用统计软件SPSS11.5 进行统计分析，用药组与模型对照组比较运用t检验。
2 结果
2.1 各组小鼠在实验第1天和第15天的体重结果 见表1。表1 富氧矿素对实验小鼠各组体重的影响 （略）注：正常饲养组与模型组比较，**P<0.01；富氧矿素低、高剂量与模型组比较，△△P>0.05
2.2 富氧矿素对实验小鼠白细胞的影响 见表2。各组小鼠在实验第15天眼眶取血1ml,立即送实验室检测WBC等。表2 富氧矿素对实验小鼠白细胞的影响 （略）注：正常饲养组与模型组比较，**P<0.01；富氧矿素低剂量与模型组比较，△△P<0.01；富氧矿素高剂量与模型组比较，△△P<0.01。富氧矿素低剂量与富氧矿素高剂量比较，P>0.05
3 讨论
富氧矿素是由美国氢弹之父艾瓦雷特研制的细胞食物，具有独家秘传配方。该机制的特点是在液态胶状悬浮物中保有78种矿物元素（小剂量）、34种酶（4种消化酶、30种代谢酶）、17种氨基酸（其中8种必需氨基酸）和重氢（水解科技）的独特能力，具有“水解”产生的高氧，提供活性电解质，调节酸碱平衡，补充代谢酶，提高新陈代谢效率，恢复细胞正常的生理功能。
环磷酰胺是一种烷化剂,临床上可用于多种恶性肿瘤的化疗,同其他化疗药物一样,其常见的副作用是抑制骨髓造血功能,尤其是对WBC 的抑制十分显著,本实验也进一步证实了环磷酰胺对WBC 的抑制作用。而WBC 减少或缺乏是恶性肿瘤患者难以完成正常化疗的一大障碍,也是导致严重感染乃至死亡的主要原因。因此,寻找一种有效而毒副作用又小的化疗辅助药物,对提高恶性肿瘤的治疗效果,减少感染机会,争取化疗时间,延长患者生命具有十分重要的意义。
本次实验造模方法是灌胃，剂量为100mg/kg,分别于实验的第1、3、5、7、9天灌胃，连续5次用环磷酰胺灌胃后，可造成典型的WBC下降的动物模型［3～5］。
小鼠的体重结果经统计学分析，正常饲养组与模型组比较，P<0.01；说明环磷酰胺可造成实验动物体重下降；富氧矿素低、高剂量与模型组比较，P>0.05，差异无显著性，说明富氧矿素对实验小鼠的体重无影响。
小鼠WBC结果经统计学分析，正常饲养组与模型组比较，P<0.01，差异有非常显著性，说明用环磷酰胺灌胃，可造成典型的WBC下降的动物模型，造模成功；富氧矿素低剂量与模型组比较，P<0.01，差异有非常显著性；富氧矿素高剂量与模型组比较，P<0.01，差异有非常显著性。说明富氧矿素有抵抗环磷酰胺造成WBC下降的作用。富氧矿素低剂量与富氧矿素高剂量比较，P>0.05，说明富氧矿素在临床剂量以上其治疗效果均较好并且与剂量（过多）无关。
这一实验结果提示富氧矿素对缓解化疗引起的WBC减少具有很好的作用,是一种极具有开发价值的化疗辅助及提高免疫的药物,其升高WBC作用的机制可能是富氧矿素提供的高氧、活性电解质、酶等，提高了机体新陈代谢效率，加强了骨髓造血的生理功能，从而使WBC升高。
【参考文献】
1 李仪奎.中药药理实验方法学.上海：上海科技出版社,1991，531.
2 郭季安.药理学.沈阳：辽宁科学技术出版社,1995，352.
3 王春艳, 崔进, 聂志，等. 念珠菌碱溶性多糖升白细胞作用的药效学研究. 昆明医学院学报，2006,（3）:9-13.
4 徐淑云.药理实验方法学. 北京:人民卫生出版社,2001，555-667.
5 商捷,刘军,李可欣,等.香菇多糖对放化疗致动物白细胞减少症的影响. 沈阳药科大学学报, 2006,23（12）:791-795.
作者单位：201203 上海，上海中医药大学基础医学院