点击显示 收起
【摘要】 目的 研究缺氧缺血性脑病（HIE）新生儿血清白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平的动态变化，并探讨其在HIE发病和病程监测中的意义。方法 用ELISA双抗体夹心法检测轻、中、重度HIE患儿出生后第1、3、7天血清IL-6和TNF-α的动态水平，以同期正常足月新生儿为对照。结果 HIE新生儿血清IL-6和TNF-α水平均显著高于正常对照组(P<0.01)，并与HIE严重程度有关。随着疗程进展，IL-6和TNF-α水平均有明显下降(P<0.01)，但仍高于正常对照组 (P<0.05)。 结论 发生HIE时，患儿血清IL-6和TNF-α升高，并与病症严重程度和治疗进程相关；IL-6和TNF-α可能参与了HIE的病理生理过程，并可用于监测临床病程进展。
【关键词】 缺氧缺血性脑病；新生儿；白细胞介素-6；肿瘤坏死因子-α
Study on the expression level and roles of IL-6 and TNF-α in neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy
LI Ya-bao，MI Zhi-kuan.Medical College of Yan’an University，Yan’an 716000，China
［Abstract］ Objective To evaluate the change of IL-6 and TNF-α level in sera of hypoxic -ischemic encephalopathy (HIE) newborns and its significance.Methods Sera samples were taken from 31 newborns diagnosed as mild (12)，moderate (10)，and severe (9) HIE at the first day，the third day，and the seventh day after birth，and 10 normal newborns servived as control at the same days after birth.IL-6 and TNF-α levels in the sera were measured with ELISA.Results Both IL-6 and TNF-α levels of the HIE groups were significantly higher than those of the normal group (P<0.01) at all of the three sample taking days.By the seventh day，both IL-6 and TNF-α levels of the HIE newborns had decreased significantly (P<0.01),but they were still higher than those of the normal control (P<0.05).Conclusion The sera level changes of both IL-6 and TNF-α of HIE newborns were correlated with the severity of the disease.IL-6 and TNF-α can play important roles in the pathological process of HIE，and IL-6 and TNF-α levels may be used to monitor the development or recovery of the disease.
［Key words］ hypoxic-ischemic encephalopathy；newborn；interleukin-6；tumor necrosis factor-α
新生儿缺氧缺血性脑病(hypoxic-ischemic encephalopathy，HIE)是指围产期窒息导致的脑缺氧缺血性损害，临床出现一系列中枢神经系统异常的表现［1］。HIE是新生儿的常见疾病，其发病机制复杂，病情严重，病死率高，存活患儿多遗留永久性神经功能损害［2，3］。因此，深入开展HIE的临床研究，是围产医学的一个重要课题。 近几年来，对HIE发病机制的研究已经取得了一定的进展，其中细胞因子在HIE发病中的作用日益受到重视［2，4］。本组对白细胞介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）两种细胞因子在HIE患儿血清中的表达水平的动态变化进行了研究，并对其在HIE发病机制中的作用作了初步探索。
1 对象与方法
1.1 对象选择
1.1.1 HIE组 根据中华医学会儿科学分会新生儿学组1996年在杭州杭州会议上制订的《新生儿缺氧缺血性脑病诊断标准和临床CT分度标准》［5］，选择延安大学医学院小儿科2004年10月～2007年3月间收治住院的31例HIE患儿为研究对象，其中轻度12例，中度10例，重度9例。
1.1.2 对照组 选择延安大学医学院产科同期分娩的正常足月顺产新生儿共10例，胎龄37～42周，出生体重2500～4000 g，无宫内感染史，无宫内发育迟缓，无宫内及生后窒息，生后7天内无合并症。母亲孕期身体健康，分娩前无明显感染史，无血制品、免疫抑制剂或增强剂使用史。
1.2 标本采集 于出生后1天、3天、7天清晨空腹，分别采集HIE患儿和正常新生儿外周静脉血2 ml，按常规方法分离血清，置-20 ℃冰箱保存备检。
1.3 试剂与仪器 IL-6 ELISA检测试剂盒和TNF-αELISA检测试剂盒均购自北京晶美生物工程有限公司。DG5031型酶标分析仪为华东电子管厂产品。
1.4 检测方法 以ELISA双抗体夹心法检测患儿外周血IL-6和TNF-α水平。用试剂盒所提供的标准稀释液按1∶2稀释标准品，并绘制标准曲线。每次检测均设空白及标准各2孔做双孔检测。在λ=450 nm处读取样品OD值，每孔测定2次，取平均值。根据样品OD值从标准曲线读取各样品相应的IL-6和TNF-α含量。
1.5 统计学分析 数据以均数±标准差(x±s)表示，两组数据比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
31例HIE患儿和10例正常对照组血清IL-6和TNF-α检测结果，见表1、表2。由结果可见，HIE组患儿血清IL-6和TNF-α水平均显著高于对照组(P<0.01)。其中轻度、中度、重度患儿与对照组间IL-6和TNF-α水平差异均有统计学意义(P<0.01)。IL-6和TNF-α水平的升高与病情严重程度呈正相关。随着疗程的进展，和患儿缺氧缺血症状的逐步改善，IL-6和TNF-α水平均有明显下降，但仍比正常对照组较高，差异有统计学意义(P<0.05)。表1 新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）血清IL-6水平 注： t与P值为HIE组与对照组比较表2 新生儿缺氧缺血性脑病（HIE）血清TNF-α水平注：t与P值为HIE组与对照组比较
3 讨论
IL-6是一种具有多种功能的细胞因子，可由单核-巨噬细胞、T细胞、B细胞、内皮细胞、成纤维细胞和骨髓基质细胞等多种细胞分泌，在不同组织中IL-6表现出不同的磷酸化而行使不同的生物学功能。在正常新生儿中枢神经系统中，含一定浓度的IL-6，以维持神经细胞正常生长生存和正常功能。发生HIE时，患儿中枢神经系统IL-6水平迅速增高，活性增强，参与HIE脑损伤的病理过程。IL-6可通过趋化作用使中性粒细胞向病变区域大量聚积、释放毒性氧基、并与其他炎性细胞协同发挥细胞毒性作用，导致脑细胞水肿或坏死［6，7］。
TNF-α也是一种多功能细胞因子，脑组织内TNF-α可由星形细胞和小胶质细胞合成，外周血TNF-α亦可通过血脑屏障进入脑组织。TNF-α在炎症和应激反应中，通过诱导合成急性反应期蛋白，介导组织损伤。发生HIE时，TNF-α水平与病情密切相关，在急性期患儿血清TNF-α明显增高，病愈时则显著降低［8，9］。
本研究结果显示HIE患儿血清IL-6和TNF-α水平显著高于正常对照组，并与HIE的严重程度有关，重度HIE患儿急性期血清IL-6和TNF-α水平显著高于轻度HIE组，随着治疗时间的逐渐延长，缺氧缺血症状的逐步改善，IL-6和TNF-α表达水平显著下降。提示在HIE早期或急性期，由于缺氧缺血产生应激反应，使血清IL-6和TNF-α水平升高，参与HIE的病理生理过程。IL-6和TNF-α作为免疫病理损伤中的重要介质，参与缺氧缺血性脑损伤的炎症反应，与HIE的严重程度有关，在一定程度上可反映HIE患儿脑损伤的程度，对病情监测具有一定意义。
综上所述，HIE患儿血清IL-6和TNF-α水平的变化，可作为临床早期判断病情严重程度，估计预后的重要参考指标之一，并为HIE的免疫学治疗提供了一定的理论基础［10］。
【参考文献】
1 Vannucci RC.Hypoxic-ischemic encephalopathy.Am J Perinatol，2000，17(3):113-120.
2 Sunshine P.Hypoxic-ischemic encephalopathy: pathophysiology and implications for therapy.Przegl Lek，2002，59 （Suppl） 1:6-9.
3 Yan W.Neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy: a clinical study of 56 cases.China Journal of Modern Medicine，2004，14(11):147-151.
4 Li YJ，Wang ZJ，Li D，et al.A study on the reactivity of peripheral leukocytes and tumor necrosis factor to acute cerebral hypoxia.China Journal of Modern Medicine，1997，7(5): 42-45.
5 韩玉昆.新生儿缺氧缺血性脑病诊断依据和临床分度.中华儿科杂志，1997，35(2):99-100.
6 Chiesa C，Pellegrini G，Panero A，et al.Umbilical cord interleukin-6 levels are elevated in term neonates with perinatal asphyxia.Eur J Clin Invest，2003，33(4):352-358.
7 Chen YS，Ji HS.Usefulness of IL-6 in diagnosis of newborn septicemia.China Journal of Modern Medicine，2002，12(1):57-59.
8 Silveira RC，Procianoy RS.Interleukin-6 and tumor necrosis factor-alpha levels in plasma and cerebrospinal fluid of term newborn infants with hypoxic-ischemic encephalopathy.J Pediatr，2003，143(5):625-629.
9 Mo LY，Zhao R，Ye ZD，et al.A comparison between sera TNF-alfar，IL-6，and CRP in sera of patients with acute infection.China Journal of Modern Medicine，2000，10(8):78.
10 Wei LG.Recent Development of pharmacological treatment of Neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy.China Journal of Modern Medicine，2002，12(4)：34-36.
作者单位：716000 陕西延安，延安大学医学院（*通讯作者）