中国研究者实验研究免疫磁珠分离羊水来源OCT-4阳性胎儿干细胞

《中华小儿外科杂志》2007年第28卷第11期 中国研究者探讨了免疫磁珠分离羊水来源OCT-4阳性胎儿干细胞的可行性。研究者采用免疫磁珠细胞分选法去除羊水细胞中CD44和SSEA4阳性细胞，使OCT-4阳性胎儿干细胞间接得到分离，体外培养扩增后，观察细胞生长特性，免疫荧光染色计算OCT-4阳性胎儿干细胞得率，Real—TimePCR比较分离前后OCT-4表达量的差异，免疫组化检测NANOG、AKP、MAP-2、NGFR和Myosin等细胞因子的表达。结果发现经免疫磁珠分离的细胞接种12h内贴壁生长，形态呈梭形，部分呈多角形．融合后形成辐射状排列。免疫荧光染色OCT-4阳性细胞得率为（90．15±8．25）％，Real—TimePCR检测结果显示分离后细胞OCT-4的表达量较未分离细胞和M义有显著性差异（P〈0．01）。原代培养可获得（1～2）×10^7个细胞，3代可获得（2～4）×10^8个细胞．传至10代以后细胞的增殖能力下降。免疫组化结果显示OCT-4阳性胎儿干细胞表达NANOG、AKP、MAP-2和NGFR等细胞因子。由此，研究者得出结论，免疫磁珠细胞分选法可以从羊水中分离出OCT-4阳性的胎儿干细胞，分离后的细胞保持干细胞原有特性及生物学特征，可作为组织工程种子细胞。