犬骨髓间充质干细胞体外分离、诱导成纤维细胞的实验研究

2006年03月10日 中华外科杂志 2005 Vol.43 No.18 P.1198-1201 18 （西安）为了探讨体外稳定诱导骨髓间充质干细胞(BMSC) 分化为成肌纤维细胞和成纤维细胞的方法，为构建组织工程瓣膜提供种子细胞。研究者应用Percoll(密度1.073 g/ml)淋巴细胞分离液分离健康犬骨髓标本，取分离的BMSC，在低糖改良Eagles培养液中培养，并用免疫组织化学的方法做细胞表型鉴定，然后用条件培养基对第2、3代细胞进行诱导分化，并用层黏连蛋白单抗对诱导后的细胞做免疫组织化学鉴定。并对诱导后细胞进行冻存，7 d后复苏观察细胞的生长、增殖及功能。结果经Percoll液分离的骨髓单核细胞，经贴壁培养后，其表型为波形蛋白阳性、α平滑肌肌动蛋白阳性、CD-34、层黏连蛋白阴性；诱导后细胞表达层黏连蛋白，阳性细胞数可达(50±3)%；诱导后BMSC经冻存复苏后，细胞复苏率(85±3)%，复苏后细胞生长、增殖旺盛，功能不受影响。可见BMSC体外能定向诱导分化为成肌纤维细胞和成纤维细胞，并符合种子细胞的要求。