点击显示 收起
解脲脲原体感染对精子膜功能的影响
解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)感染可导致男性不育[1],但其致病机理尚未清楚。本文利用测定精子膜功能的低渗膨胀试验(hypoosmotic swelling test,HOST)就解脲脲原体感染对精子膜功能的影响作一探讨。精子尾部肿胀现象是由于渗透压的改变所致。根据膨胀情况分为b~g型,而g型精子尾部全部膨胀,表示细胞膜机能良好。
1 材料与方法
1.1 检测对象 70例婚后同居两年以上、性生活正常(女方检查生殖器官及内分泌正常)的不育男性,禁欲3~5天,实验室内手淫无菌采集全部新鲜精液,做解脲脲原体培养,精液液化后作低渗膨胀试验。21例生育能力正常、UU阴性的男性作为对照组。
1.2 解脲脲原体培养 使用开封医专男性学研究所研制的解脲脲原体培养基,接种100 μl精液,置37°C烛缸内培养1~3天,培养基仍为黄色者为UU阴性;变为红色者用滤菌器过滤培养液,接种滤液于固体培养基上,培养2~5天,显微镜观察到油煎蛋样菌落为UU阳性。
1.3 精子低渗膨胀试验 取液化精液100 μl,加入预温37°C膨胀试剂(含2个结晶水分子的柠檬酸钠7.35 g,果糖13.51 g,溶解后加蒸馏水至1 000 ml)1 ml混匀,置37°C水浴30 min,然后加伊红Y溶液(伊红Y 0.7 g,0.15 mol/L pH 7.4 PBS溶解并加至100 ml)50 μl,混匀室温放置2 min,高倍镜下观察200个精子,计数b~g型精子百分率(精子总膨胀率)及g型精子百分率(g型精子膨胀率)。
2 结果
2.1 精液UU培养结果 70例男性不育症精液标本,UU阳性者39例,阳性率55.71%,阴性31例,占44.29%,见表1。
表1 解脲脲原体及精子低渗膨胀试验检测结果
组 别 | n | b~g型(%)
( |
g型(%)
( |
对照组 | 21 | 71.31±14.45 | 25.5±5.44 |
UU阴性组 | 31 | 54.2±12.22 | 14.42±6.78 |
UU阳性组 | 39 | 42.26±9.12 | 10.28±4.91 |
结果显示UU阴性组与UU阳性组相比,精子总膨胀率及g型精子膨胀率相比具有非常显著差异(P<0.01),UU阴性和UU阳性之不育组与正常组相比有显著性差异(P<0.01)3 讨论
低渗膨胀试验是通过低渗溶液(150 mosm/L)来检测精子膜功能的实验,b~g型精子越多显示精子膜功能越好,而以g型精子膜功能最好,研究表明生育力正常的男性b~g型及g型精子明显高于不育男性[2],并且与精子活率、活力、畸形精子百分率以及去透明带仓鼠卵穿透率呈显著性相关,是一种简单而有效的精子膜功能检测指标。
解脲脲原体可侵入生精细胞造成精子结构破坏,使精子尾部严重卷曲并呈绒毛状外观,并可吸附于精子表面,造成部分精子膜缺损、结构破坏,使精子膜双层类脂分子紊乱和胞内代谢物外溢[3],还可利用膜上的脂肪酸、磷脂和膜内的胆固醇,甚至导致精子膜与UU膜融合,UU胞浆内毒性蛋白和类脂直接纳入精子胞内,引起胞内结构上的损伤和破坏。本实验结果显示,UU感染引起精子膜功能明显降低,b~g型及g型精子均明显低于非感染者,统计性分析有显著性差异,说明解脲支原体感染影响到精子膜功能,使膜功能降低,进而引起男性不育;在临床工作中,将UU检测作为不育症病人精液常规检查项目是很有必要的。
参考文献
1 吴近曾,高谷音.解脲支原体感染与不育不孕关系探讨.男性学杂志,1991,5(1):27
2 何述祥,彭莉萍,才建华.精子低渗肿胀试验对男子不育症的诊断意义,上海医学检验杂志,1994,9(2):100
3 徐晨,徐胜,王一飞.解脲支原体引起男性不育的机理研究1精子形态学观察.男性学杂志,1992,6(2):66