高效毛细管电泳分离测定枸橼酸托瑞米芬的Z、E异构体

　 (华北制药集团有限责任公司研究所　石家庄　050015)

(北京博辽药物研究所　100029)

摘要　　采用高效毛细管电泳法将枸橼酸托瑞米芬的Z、E异构体完全分离，并测定了数批枸橼酸托瑞米芬样品中异构体Z的百分含量，方法简便、高效、快速，为枸橼酸托瑞米芬的测定提供了一种新方法。

枸橼酸托瑞米芬是1988年上市的一种抗肿瘤药。其有效成分为Z型异构体，因此，有必要控制其E型异构体的量，以保证药品质量。与之结构相似的枸橼酸他莫昔芬部颁标准要求，其E型异构体不得超过0.5 %，测定是采用高效液相色谱法^［1］。高效毛细管电泳作为一种最新的分离分析技术，用于手性药物对映体的分离已有报道^［2］。本文采用α-环糊精分离测定了枸橼酸托瑞米芬Z、E异构体。1　试剂与试药
枸橼酸托瑞米芬(北京博辽药物研究所提供)，α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、甲基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精(Sigma产品)，三羟甲基氨基甲烷(Tris，天津市医药公司)，磷酸(分析纯，天津市化学试剂六厂)。
2　仪器及实验条件
高效毛细管电泳仪：Beckman P/ACE 5000型，毛细管：67 cm(有效长度60 cm)×50 μm(河北永年光导纤维厂)，检测波长：214 nm；进样：低压进样(3447 N/m²)5 s，电压：30 kV；温度：25 ℃；缓冲液：50 m mol/L的Tris水溶液，用磷酸调至pH 2.4。
3　环糊精的种类及浓度的影响
试验表明(见图1—A)，所用5种环糊精(CD)中，以α-环糊精最好，γ-环糊精和羟丙基-β-环糊精无法使之分离。β-环糊精和甲基-β-环糊精虽能分开Z、E异构体，但迁移时间较长，另外，还做了不加环糊精的试验，结果未能使两者分离，本文选择α-环糊精作为异构体分离剂。α-环糊精的浓度对分离度及迁移时间的影响见图1—B。

图1　环糊精的种类(A)、α-环糊精的浓度(B)
对迁移时间的影响
1.E异构体　2.Z异构体

4　缓冲液的pH及浓度的影响
缓冲液的pH在3以上时，分离效果差，pH在2.0～3.0之间，可以使Z、E异构体基线分离。实验中发现，当缓冲液的浓度小于20 m mol/L时，无论如何改变其它因素，分离效果都不理想。最终选择浓度50 m mol/L的Tris溶液，pH为2.4(用磷酸调节)作缓冲液(图2—A、B)，可在14 min内基线分离枸橼酸托瑞米芬的Z、E异构体(图3)。

图2　缓冲液浓度(A)、pH(B)对迁移时间的影响
1.E异构体　2.Z异构体

图3　枸橼酸托瑞米芬Z、E异构体电泳图
1.E异构体　2.Z异构体

5　样品的测定
将5批样品，用上述方法测定，结果5批枸橼酸托瑞米芬Z异构体的含量分别为98.11 %、99.54 %、98.52 %、99.20 %、94.30 %。电泳图见图4。

图4　枸橼酸托瑞米芬样品的电泳图
1.E异构体　2.Z异构体

6　讨论
本法与高效液相色谱法相比，具有柱效高(塔板数为10⁶/m)，分离效果好，分离时间短，实验费用少的优点。

参考文献
1　　卫生部部颁质量标准.WS—129(X—89)—91.枸橼酸他莫昔芬
2　　B L Karger.8th International Symposium on high performance capillary electrophoresis.J Chromatography A,1996,745(1-2):148

(本文于1997年5月8日收到)

Separation and Determination of Z、E Isomers of Toremifene

Citrate by High Performance Capillary Electrophoresis

Zhu Shiqing and Niu Changqun
(New Drugs Research and Development Centre,
North China Pharmaceutical Group,Shijiazhuang,050015)

Liu Quanzhi
(Beijing Boom Institute of Materia Medica,100029)

　　Abstract:A new high performance capillary electrophoresis method for the separation of Z、E isomers of toremifene citrate was developed by optimizing the major affecting factors.The Z isomer content in several lots of sample was determined by this method.The results show that the established method is suitable to analyse Z、E isomers of toremifene citrate due to its advantages of high performance,high speed and easy operation.
　　Key words:toremifene citrate,Z、E isomers,high performance capillary electrophoresis