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Key words chlamydia pneumoniae antibody coronary heart disease C-reactive protein
以动脉粥样硬化（AS）为主要病理改变的冠心病（CHD）是危害人民健康的严重疾病。现在的观点认为CHD为一多因素疾病。其中高血压、血脂代谢紊乱、胰岛素抵抗、吸烟等作为其致病原因，已为人们所公知，但仍有约50%的患者病因不明 ［1］ 。近来，众多的临床流行病学及病理学研究均提示，感染因素可能参与冠心病的发生发展 ［2］ 。此观点认为炎症所激活的炎细胞和平滑肌细胞过度产生促炎因子，从而促进动脉粥样硬化的发生与发展。近些年来认为肺炎衣原体、幽门螺杆菌（Hp）、巨细胞病毒及单纯疱疹病毒等微生物可能是AS及CHD的危险因素，其中对CPn的研究较为广泛和深入 ［3～8］ 。然而也有学者认为CPn感染与冠心病或急性冠脉综合征之间无相关性 ［9］ 。针对CPn感染的抗生素临床干预试验结果也不尽相同。冠心病患者CPn感染与冠脉狭窄程度的关系报道极少，CRP在急性冠脉综合征中的预测作用为广大学者所共识。在CHD患者中CRP与CPn感染的关系亦报道极少。本试验测定CHD患者CPn感染情况及其与CRP、冠脉狭窄程度之间的关系，为CPn感染与动脉粥样硬化发生发展之间的关系及其CPn引起的CHD的可能机制提供理论依据。
1 临床资料
1.1 一般资料 选自2003年6月～2003年12月在我院住院且行CAG的患者共60例。其中男36例，女24例，年龄34～78岁，平均年龄（55.8±12.5）岁。根据冠脉狭窄程度分组，正常组:无冠脉狭窄，共20例，男11例，女9例，年龄34～72岁，平均年龄（47.6±15.5）岁;轻度狭窄组:存在冠脉狭窄，但狭窄程度均<70%，共16例，男7例，女9例，年龄38～72岁，平均年龄（59.2±9.5）岁;重度狭窄组:至少存在一支狭窄程度大于或等于70%的冠脉，共24例，男18例，女6例，年龄36～78岁，平均年龄（59.2±13）岁。根据病史、临床表现及辅助检查分正
常组:同上;稳定性心绞痛组（SAP）:共23例，其中男13例，女10例，年龄40～76岁，平均年龄（60.9±13.4）岁;急性冠脉综合征组17例，包括不稳定性心绞痛（UAP）9例，AMI8例，其中男12例，女5例，年龄46～78岁，平均年龄（55.9±13.4）岁。根据CPn抗体测定结果分为CPn抗体阳性组及阴性组。以上病例均排除感染性疾病、自身免疫行疾病、肿瘤、肝硬化、急性或慢性进行性疾病且近3个月来无大手术及严重创伤。上述分组无年龄性别差异（P>0.05），具有可比性。
1.2 方法 所有患者均于冠脉造影前采股动脉血5ml，肝素抗凝，置无菌带试管中，离心（3000r/min，10min）、分离血清后置-20°C低温冰箱中保存待测。标本测定:肺炎衣原体IgG、IgM抗体测定采用ELISA方法（酶联免疫吸附试验），CRP检测采用乳胶凝集法。肺炎衣原体IgG、IgM抗体检测试剂盒由无锡东林科技发展有限公司提供，CRP乳胶试剂盒由上海伊华医学科技有限公司提供。以上标本采集、保存、测定均严格按试剂盒说明书进行。
1.3 统计学处理 计数资料组间率的比较用χ 2 或校正的χ 2 检验，P<0.05为差异有显著性。
2 结果
2.1 轻度狭窄组、重度狭窄组及对照组之间CpnIgG与CpˉnIgM阳性率的比较 见表1。
从表1可以看出，轻度狭窄组及重度狭窄CpnIgG阳性率高于正常组，CpnIgM阳性率在轻度狭窄组及重度狭窄组也稍高于正常组，但轻度狭窄组及重度狭窄组之间的CpˉnIgG无显著差异。轻度狭窄组、重度狭窄组及正常组的 CpnIgM阳性率之间差异无统计学意义。
2.2 SAP、ACS及正常组之间CpnIgG、IgM阳性率的比较 见表2。
表1各组间IgG及IgM阳性率比较 （略）
表2 SAP、ACS及正常组之间CpnIgG、IgM阳性率的比较略
由表2可见CpnIgG阳性率在正常组、SAP组及ACS组分别升高CpnIgM阳性率在三组间也不相同，经统计学处理得出以下结论:IgG阳性率在SAP组及ACS组均高于正常组但SAP组与ACS组之间差异无显著性;IgM阳性率在正常组、SAP组及ACS组三组之间差异无显著性。
2.3 CRP阳性率在各组间的比较 见表3、表4。
表3 CRP阳性率在正常组、SAP组及ACS组之间的比较略
3 讨论
3.1 CPn感染与动脉粥样硬化之间的关系 CPn是介于病毒和细菌之间的细胞内专性寄生微生物。在感染过程中机体产生抗表面抗原的抗体，其主要表面抗原为特异性的外膜蛋白和脂多糖（LPS）。故检测CPn特异性抗体是主要的血清流行病学手段。初次感染CPn时IgM抗体与发病后3 周出现。IgG常在1～2周后开始出现且效价很高，但往往无IgM出现或效价很低 ［10］ 。目前常用的血清检测方法是微量免疫荧光检查（MIF）和酶联免疫吸附试验（ELISA）。此外尚有针对CPn的外膜蛋白基因区，16srRNA基因区及16kD富含半光氨酸蛋白（CrP）基因
区的PCR技术 ［10］ 。自从1988年Saikkn首次发现CPn特异性抗体阳性率与健康者之间差异显著以来，国外学者对CPn感染与CHD之间的关系进行了大量研究，结果大多支持两者之间存在一定关系。但对冠脉狭窄程度与CPn感染之间的关系少见报道。本研究采用ELISA方法检测CPn特异性IgG及IgM，结果表明:重度狭窄组及轻度狭窄组IgG阳性率（62.5%，68.75%）均显著高于正常组，此结果支持国内外大多数血清学实验结果即:CHD患者（包括轻度狭窄及重度狭窄）的IgG抗体阳性率高于正常组，说明CPn慢性感染与CHD之间存在一定关系。葛均波领导的课题组的研究结果显示冠状动脉粥样硬化组CpnIgG阳性率显著高于正常对照组并且随病变程度加重而呈上升趋势。Metha ［9］ 尸检发现重度狭窄组CPn检出率（86%）显著高于轻度狭窄组（16%），而本试验表明轻度狭窄组与重度狭窄组IgG阳性率差异无显著性，未发现CPn慢性感染与冠脉狭窄程度存在一定关系。另外，60例检测对象中30例患者CpnIgG抗体阳性，阳性率50%，与国外报道的20～70岁成年人50%～70%阳性率相似 ［11］ ，比国内郭新贵报道的74.19%的阳性率略低 ［6］ ，此现象的存在可能受感染方式、感染者免疫状态、既往接种、感染剂量、个体抗体反应差异性等诸多因素影响有关，另外也不能排除地区差异。三组CpnIgM抗体阳性率低（10%、31.25%、29.17%）且相互之间差异无显著性，与国内外研究相似 ［6，10］ 。IgM抗体只在感染急性期出现可解释此现象。也说明CHD发生发展与CPn急性感染关系不大。而CPn感染产生的特异性IgG抗体滴度由升高降至1/8至少需16个月，最长达9年。再感染后抗体存在时间长且滴度很少下降 ［12］ 。
3.2 CPn感染与SAP和ACS的关系 近来有研究表明CPn感染可能导致ACS患者动脉粥样硬化斑块的不稳定性 ［13］ 。赫尔辛基心脏研究（HELSINKI HEART STUDY）提示抗CPn抗体与以后ACS的发生有关联。国内刘冰冰等报道AMI患者CpnIgG升高。动脉粥样硬化斑块内均存在单核细胞、巨噬细胞和T淋巴细胞，而且，这些细胞升高在UAP中较 SAP中丰富，提示炎症反应在UAP中确实是存在的，Kol等发现衣原体热休克蛋白与人类热休克蛋白60抗体存在交叉反应，从而能诱导巨噬细胞产生肿瘤坏死因子-α及基质金属蛋白酶，前者可促进间质性胶原酶合成与释放，降解大分子基质性胶原的合成;而后者可降解胞外基质成分，这样即可增加基质降解从而破坏斑块的稳定性。此外，CPn感染内皮细胞和平滑肌细胞，活化NFκB，后者可诱导感染细胞过量表达IL-6、TF、及PAI-1，而IL-6是重要促炎性介质，致动脉粥样硬化斑块不稳定，TF及PAI-1激活凝血与补体系统，促进血栓形成 ［7］ 。而本研究提示CpnIgG阳性率在SAP组（60.8%）及ACS组（70.6%）均高于正常组（20%），但SAP组及ACS组之间差异无显著性。只是显示CPn感染与CHD发生发展有关，而并没有支持CPn感染与ACS的发生有一定关系，尽管ACS组CpnIgG与SAP组相比有增加趋势。这与国内黄文增等报道的ACS组CpnIgG阳性率显著高SAP组及正常组不同 ［6］ 。除前面提到的导致相互间研究结果差异的因素外，可能也与本研究选择样本数量相对较少有关。本研究显示，CpnIgM阳性率在此三组中（30.4%，29.4%，10%）阳性率低，且组间差异不显著。
3.3 CPn感染与CRP的关系 CRP是免疫反应蛋白（AD）的一种，正常血清含量很低，它在多种急性和慢性感染、组织损伤、恶性肿瘤、心肌梗死、手术创伤时均可升高，它的产生主要由IL-6、TNF-α等炎性因子刺激肝细胞、单核巨噬细胞等产生 ［14］ 。病原体导致的血管内皮炎症病灶中有大量CRP沉积，炎症细胞含有CRP受体，CRP活化炎症细胞，通过直接（浸润、聚集）或间接（产生细胞因子）的作用，引起血管内皮受损，导致血管痉挛、脂质代谢紊乱，产生动脉粥样硬化。CRP在急性心急梗塞时升高已为大多数人所共识，此点在本试验中
也得到证实，本试验中CRP在ACS中的阳性率（70.59%）显著高于正常组（5%）及SAP组（13.04%）Toos等证明CPn抗体阳性的CHD病人血中CRP浓度明显升高，国内黄文增等已得出相似结论 ［12］ 。本试验CpnIgG（+）组中CRP阳性率（40%）显著高于阴性组（13.3%），同国内外结论一致，支持CPn感染产生的炎症反应，参与动脉粥样硬化的发生与发展。
3.4 局限性 本试验从血清流行病学方面支持CPn感染及炎症反应与动脉粥样硬化之间存在一定关系，但无法区分是CPn感染后引发动脉粥样硬化使CPn易感性高。要证明它们之间的关系尚需大规模临床试验。
参考文献
1 Niemenen M，Voltonen V.Infection and inflammation as risk factors for myocardio infection.Eur Heart J，1993，14:12-16.
2 Danesh J，Peto R.Chronic infection and coronary heart disease:is there a link?Lancet，1997，350:430-436.
3 Saikku P，Leinonen M.Serological evidence of an association of a novel Clamydia，TWAR，with chronic coronary heart disease and AMI.Lancet，1998，2983-2986.
4 Fong IW，Chin B.Rabbit model for chlamydia pneumoniae infection.J Clin Microbiol，1997，35:48-52.
5 Maass M，Bartels C.Endovascular presence of viable Chlamgdia pneuˉmoniae is a common phenomenon in coronary artery disease.J Am Coll Cardiol，1998，31:827-832.
6 黄文增，吴小凡.炎症反应、肺炎衣原体与不稳定心绞痛相关性研究.临床心血管病杂志，2002，18（3）:112-114.
7 Ramirez JA.Isolation of chlamgdia pneumoniae from the coronary atery of a patient with coronary atherosclerosis.Ann Intern Med，1996，125:979-982.
8 Inokubo Y，Hanada H.Plasma levels of matrix metalloproteinase-9and tissue inhibitor of metalloproteinase-1are increased in the coronary circulation in patients with acte coronary sndrome.Am Heart J，2001，1412:211-217.
9 Danesh J.Chronic infection with Helocobacter pylori，chlamydia pneuˉmoniae:population based study of coronary heart disease.Heart.1999，81:245-247.
10 朱瑾.肺炎衣原体诊断学研究进展.国外医学临床生化与检验 学分册，1997，18（4）:186.
11 Roivainen M，Vilk K.infections inflammation and the riskof cofonary heart
disease.Circulation，2000，101:252-257.
12 Thomas JM thorax.Chlamydia pneumoniae，1993，48:54.
13 Shimada K.High prevalence of seropositivity for antibodies to Cpn-specific LPS in patients with acute coronary syndrome.J Cardivasc Rish，2000，7（3）:209-213.
14 金惠铭主编.病理生理学.第五版.北京:人民卫生出版社，2000，109-110.
作者单位:100007北京市第六医院心内科
（收稿日期:2004-02-24） （编辑李 木）