点击显示 收起
【摘要】 目的 探讨VEGFR-3和VEGF-C在乳腺癌中的表达，分析表达结果与肿瘤临床分期及淋巴结转移的关系，为临床指导治疗及判断预后提供依据。方法 采用免疫组化SP法检测75例乳腺癌中的VEGFR-3和VEGF-C的表达。结果 75例乳腺癌组织中VEGFR-3 和VEGF-C阳性表达率分别为52.00％（39/75）、74.66％（56/75）；乳腺癌组织中VEGFR-3和VEGF-C阳性表达率在有、无淋巴结转移组之间的差异均有显著性（P<0.05）；VEGFR-3和VEGF-C在乳腺癌中的阳性表达率与临床分期呈正相关；微淋巴管计数在VEGFR-3表达阳性组和阴性组之间的差异有显著性（P<0.01）。结论 VEGFR-3和VEGF-C在乳腺癌中的表达与肿瘤临床分期及淋巴结转移的关系密切。
【关键词】 乳腺癌；血管内皮生长因子受体-3；血管内皮生长因子-C；淋巴结转移
Expression of VEGFR-3 and VEGF-C in human breast cancer and their significance
LI Zhi-xin,HE Zhi-lin.Department of Pathology, Central Hospital of Xiangtan, Xiangtan 411100,China
【Abstract】 Objective To investigate the expression of VEGFR-3 and VEGF-C in breast cancer ,and explorer their correlation to different clinical TNM stages and lymphatic metastasis,for providing evidence for clinical treatment and prognosis.Methods The expression of VEGFR-3 and VEGF-C in 72 cases of breast cancer were respectively detected by SP immunohistochemistry.Results The positive rates of VEGFR-3 and VEGF-C in 75 samples of breast cancer were 52.00％and 74.66% respectively ;The positive expression rates of VEGFR-3 and VEGF-C in breast cancer with lymph node metastasis were significantly higher than that without lymph node metastasis（P<0.05）;The expression of VEGFR-3 and VEGF-C in breast cancer were positively correlated with clinical TNM stages;There is significantly difference between the VEGFR-3-positive group and negative group in the counts of lymph vessels（P<0.01）.Conclusion The expressions of VEGFR-3 and VEGF-C in breast cancer have close relations with lymph node metastasis and clinical TNM stages.
【Key words】 breast cancer; VEGFR-3; VEGF-C; lymph node metastasis
乳腺癌是我国女性最常见的恶性肿瘤之一，也是严重威胁女性健康的重要疾病，而淋巴结转移是影响乳腺癌患者预后的重要因素,故乳腺癌的淋巴管的生成和淋巴结的转移是近年来研究的热点之一。已有的研究表明，血管内皮生长因子-C（ vascular endothelial growth factor C, VEGF-C）是淋巴管内皮细胞增殖和趋化的特异诱导因子，血管内皮生长因子受体3（ vascular endothelial growth factor receptor 3, VEGFR-3） 是VEGF-C受体，VEGF-C和VEGFR-3可以诱导肿瘤内部新生淋巴管形成和肿瘤组织周围淋巴管扩张，其表达强度与淋巴结转移以及预后有密切关系［1］。本文通过检测75例乳腺癌组织中VEGFR-3、VEGF-C两种蛋白表达和微淋巴管计数，探讨它们与乳腺癌的临床分期及淋巴结转移的关系，为临床指导治疗及判断预后提供依据。
1 资料与方法
1．1 临床病理资料 所有材料取自2000年1月～2004年8月在我院行根治术的乳腺癌标本，全部标本均经10％甲醛固定，常规取材后经酒精梯度脱水，石蜡包埋制片；全部病例术前均未接受化疗、放疗及其他治疗，术后经病理明确诊断。年龄29～78岁，平均51.4岁，乳腺癌按2003年WHO标准分为临床0期、临床Ⅰ期、临床Ⅱ期、临床Ⅲ期、临床Ⅳ期，本组75例乳腺癌患者中无临床Ⅳ期病例；本组75例乳腺癌患者有淋巴结转移者41例，无淋巴结转移者34例；组织学分级按WHO标准分为组织学Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级。
1．2 试验方法和实剂 兔抗人VEGFR-3、VEGF-C多克隆抗体、SP 9000试剂盒、DAB试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司；采用SP三步法，均按照说明书操作。PBS代替一抗作为阴性对照。
1．3 结果判断 VEGFR-3和VEGF-C两种蛋白均表达于癌细胞胞浆，呈棕黄色颗粒；计数5个不同高倍视野下200个癌细胞，阳性细胞数>10％为该抗体表达阳性，≤10％为阴性；微淋巴管计数：凡VEGR-3染色为棕黄色，管腔由单层内皮细胞构成，周围无平滑肌细胞，管腔内无红细胞，可认定为淋巴管。参照weidner［2］进行微淋巴管计数，在低倍镜视野下（×100）观察全切片淋巴管分布情况后，选择四个淋巴管密集区域，以高倍显微镜（×200倍）计数每个区域的微淋巴管，以四个区域最大值为该标本的微淋巴管计数。
1．4 统计学处理 在微机上用SPSS 11.5统计软件包作统计学处理，所得数据采用χ2检验。
2 结果
2．1 乳腺癌细胞VEGFR-3和VEGF-C免疫组化染色结果 表达VEGFR-3及VEGFR-C阳性的乳腺癌细胞具有围绕表达VEGFR-3阳性的微淋巴管分布的特点，而肿瘤新生的微淋巴管主要分布在乳腺癌肿块的边缘，尤其集中在浸润周围组织的间质中，而肿瘤周围的乳腺组织几乎不表达VEGFR-3和VEGF-C两种蛋白。
2．2 75例乳腺癌VEGFR-3和VEGF-C表达与临床病理关系 VEGFR-3和VEGF-C在乳腺癌组织中的表达见表1，从表1中可以看出,VEGFR-3和VEGF-C在乳腺癌组织中阳性表达率均随临床分期增高而升高；VEGFR-3和VEGF-C 阳性表达率在临床0期、Ⅰ期与临床Ⅱ、Ⅲ期两组之间的差异均有显著性（P<0.05）；有淋巴结转移的VEGFR-3和VEGF-C阳性表达率分别为63.17％、87.80％；而无淋巴结转移组的VEGFR-3和VEGF-C 阳性率分别为37.94％、58.82％，两者之间的差异均有统计学意义（P<0.05）, 在VEGFR-3表达阳性组的乳腺癌患者的微淋巴管计数明显高于阴性组，且两者之间的差异有显著性（P<0.01）。VEGFR-3和VEGF-C 阳性表达与原发肿瘤大小、年龄及组织学分级均无统计学意义（P>0.05），见表2。
3 讨论
血管内皮生长因子-3（VEGFR-3）属于受体酪氨酸蛋白激酶家族中的一个成员，是一种典型的跨膜蛋白，VEGFR-3与其配体VEGF-C及VEGF-D特异性结合，可诱导内皮细胞的增殖及迁移，调控血管及淋巴管内皮细胞的新生，对胚胎发育及肿瘤的生长和转移起着重要的调节作用［3］；同时有些肿瘤细胞如在淋巴瘤，乳腺癌周围组织，卡波氏肉瘤细胞及肾母细胞瘤细胞中均可检测到VEGFR-3不同程度的表达［4］。本实验结果发现VEGFR-3 表1 乳腺癌VEGFR－3、VEGF－C表达与临床分期的关系表2 乳腺癌VEGFR－3、VEGF－C表达与年龄、肿瘤大小的关系注：P>0.05差异无显著性
在乳腺癌细胞中亦有表达，其阳性表达率为52.00％，此与张明仪等的结论基本一致［5］；VEGFR-3阳性表达率随着临床分期增加而升高, 与之关系密切的VEGF-C蛋白在乳腺癌组织中表达也有类似的现象，这说明两者的阳性表达率与乳腺癌临床分期呈正相关。在本研究中还发现，表达VEGFR-3及VEGF-C阳性的肿瘤细胞具有围绕微淋巴管及在肿瘤浸润边缘组织集中分布的特点，提示乳腺癌细胞可能有分泌VEGFR-3和VEGF-C两种蛋白的能力，从而共同诱导肿瘤及其周围组织形成微淋巴管。本研究中微淋巴管计数在VEGFR-3表达阳性组与阴性组比较有显著的统计学意义，在有无淋巴结转移两组的比较中，VEGFR-3和VEGF-C阳性表达率的差异均有统计学意义。综上所述，随着乳腺癌患者的临床分期增高，癌细胞中VEGFR-3和VEGF-C阳性表达率也越高，则越易诱导微淋巴管形成，随着微淋巴管计数越多，癌细胞与之接触淋巴管的机会越多，则肿瘤细胞通过淋巴管向周围组织浸润扩散及远处淋巴结转移可能性增加；故乳腺癌中的VEGFR-3和VEGF-C的表达也许可以作为判断乳癌患者预后的指标之一。
转移是肿瘤主要的致死因素，因此如何抑制肿瘤转移一直是人们关注的问题。在表达VEGFR-3的乳腺癌中，乳癌的腋窝淋巴结转移率为60％［6］，如能运用基因疗法或其他的治疗方法抑制或阻止乳腺癌组织中VEGFR-3和VEGF-C两种蛋白的过度表达，也许能阻止或减少肿瘤形成微淋巴管，也就防止了肿瘤浸润扩散及淋巴结转移；从而能改善乳腺癌患者的预后和提高其生存率。
本研究结果表明，检测乳腺癌中的VEGFR-3和VEGF-C的表达，对于临床判断乳腺癌患者预后和指导治疗有重要意义。
【参考文献】
1 吕志强，李海刚，谢得荣，等．非小细胞肺癌组织中VEGF-C和VEGFR-3的表达及其临床意义．癌症，2005，24（9）：1132-1135．
2 彭再如，文宇，朱煊，等．前列腺癌VEGF-C表达及淋巴管计数的免疫组化研究．实用预防医学，2007，14（1）：33-35．
3 Karkkainen MJ，Petrova TV．Vascular endothelial growth factor receptors in regulation of angiogenesis and lymphangiogenesis．Oncogene，2000，19：5598-5603．
4 Valtola R，Salven P，Heikkila P，et al．VEGFR-3 and its ligand VEGF-C are associated with angiogenesis in breast cancer．Am Pathol，1999，154（5）：1381-1390．
5 张明仪，吴建农，张建新，等．VEGFR-3在胃癌细胞中表达的意义．肿瘤防治研究，2007，34（1）：32-34．
6 李伟，张正旭. VEGFR-3与肿瘤转移的关系.哈尔滨医药，2004，24（3）:49-50.
作者单位：411100 湖南湘潭，湘潭市中心医院病理科