高强度聚焦超声治疗前后恶性肿瘤患者外周血免疫功能的变化

关键词 高强度聚焦超声 肿瘤 免疫 流式细胞术

Changes of peripheral immune function in patients

with solid malignancies treated by high-intensity focused ultrasound

Lu Pei，Wu Feng，Xu Zhonglin，et al.

Clinical Center for Tumor Therapy of2 nd Affiliated Hospital，Institute of Ultrasonic

Engineering in Medicine，Chongqing University of Medical Science，Chongqing400010.

【Abstract】 Objective To observe the changes of peripheral immune function in patients with solid malignan_ˉcies treated by high-intensity focused ultrasound（HIFU）.Methods Using flow cytometry technique，the percent_ˉage of CD₃ ⁺ ，CD₄ ⁺ ，CD₈ ⁺ ，CD₁₉ ⁺ ，CD（₁₆ + +₅₆ ⁺ ）in peripheral blood was assessed in16patients with solid malignancies before and1～2week after HIFU treatment.Measurements were analyzed by Student t test.Results Peripheral CD4 ⁺ （P=0.009）and theratio of CD4/CD8（P=0.012）were significantly increased postoperatively.Slight elevation of CD3 ⁺ and slight diminish of CD₈ ⁺ ，CD₁₉ ⁺ ，CD（₁₆ ⁺ +₅₆ ⁺ ）were detected after HIFU treatment But no statistical differences were found pre-and postoperatively（P>0.05）.Conclusion Peripheral cellular imˉmune function could be significantly enhanced in patients with solid malignancies after HIFU treatment.

Key words high-intensity focused ultrasound neoplasm immune flow cytometry

高强度聚焦超声（high intensity focused ultrasound，HIFU）是近年来开始在临床应用的一种热凝固治疗实体肿瘤的方法。本研究从2001年9月～2002年3月观察了16例恶性肿瘤病人HIFU治疗前后外周血免疫功能的变化，初步结果如下。

1 资料与方法

1.1 研究对象 病理学确诊的恶性肿瘤病人16例（男8例，女8例），年龄9～74岁，平均40.75±20.9岁。其中，骨肉瘤6例，原发性肝癌5例，肾癌5例。

1.2 HIFU治疗情况 JC型高强度聚焦超声肿瘤治疗系统由重庆海扶技术有限公司生产。治疗参数:频率0.8MHz，焦距135mm，焦域1.1mm×9.8mm×9.8mm，声强5000～20000W/cm ² 。治疗在全麻或硬膜外麻醉下进行，利用逐层适形扫描技术，根据治疗层面治疗前后声像图形态和组织回声变化，实时反馈控制治疗方案中预置的超声剂量，保证完全破坏靶区肿瘤组织。

1.3 研究方法

1.3.1 主要试剂及仪器 FACScalibur流式细胞仪（美国Becton Dickinson公司）;Simultest IMK-Lymphocyte淋巴细胞 检测试剂盒（鼠源性直接荧光单抗，美国Becton Dickinson公司）。检测指标包括CD₃ ⁺ 、CD₄ ⁺ 、CD₈ ⁺ 、CD（₁₆ ⁺ +₅₆ ⁺ ）、CD₁₉ ⁺ 。

1.3.2 标本采取 病人入院当日及HIFU后1～2周，晨起自肘静脉抽取空腹血2ml，加入专用试管，即时送检。

1.3.3 操作程序 取100μl肝素抗凝全血加于试管底部，分别加入20μl荧光素标记的抗单克隆抗体，混匀，室温孵育30min，0.01MPBS缓冲液冲洗2遍，加红细胞溶解液2ml，充分混匀，10min后待红细胞完全溶解上流式细胞仪检测。激光波长488nm，计数10000个细胞，用Simulsetv3.0软件分析，以百分率报告。