摘要:1 科学研究:药物研究开发与基础研究 药物研究与开发 (1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究,中药有效成分筛选与鉴定等。 (3) 基因工程药物研究与开发:如干扰素研究与开发,细胞生长因子研究与开发等。 (4) 细胞工...
07-09-25摘要:培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。 一、基础培养基 绝大多数培养基是建...
07-09-25摘要:前段时间,经历了几个月的时间,为实验室建了一个细胞培养间。目前这个细胞培养间运转良好,培养的神经元长了10来天,长势不错,已经可以认为细胞培养室建立成功。在建立细胞培养间的过程中,碰到了许多问题,逐一...
07-09-25摘要:名称机制转染效率用途优缺点影响因素磷酸钙转染法内吞作用20%细胞被转染瞬时表达1、简单有效 2、适用于贴壁、非贴壁细胞3、常作首选方法1、Ca2+,DNA浓度 2、PH值,沉淀反应时间3、氯喹,甘油和丁酸钠处理DEAE葡聚...
07-09-25摘要:如小鼠细胞株多选 RPMI1640 。 细胞系 细胞类型 种 组 织 培养基 293 成纤维细胞 人胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清 IMR-90成纤维细胞 人肺MEM, 10% 胎牛血清 和 NEAAW1-38成纤维细胞 人胚胎肺,3月妊娠MEM, 10% 胎牛...
07-09-25摘要:如何选用特殊细胞系培养基。培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。
07-09-25摘要:超净台的优点是操作方便自如,比较舒适,工作效率高,预备时间短,开机10分钟以上即可操作,基本上可随时使用。在工厂化生产中,接种工作量很大,需要经常长久地工作时,超净台是很理想的设备。超净台由三相电机作...
07-09-25摘要:一、原理扫描电镜用于观察标本的表面形态。用戊二醛和锇酸处理的染色体标本,经单宁酸(或硫卡巴肼)还原可获得较好的导电染色效果。在扫描电镜下可观察到染色体的三维结构,也可用于常规染色体核型、G带染色体核型...
07-09-25摘要:一、原代细胞培养(一)原理细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件,将细胞从机体中取出,在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代,进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。近年来,广泛地应用于...
07-09-25摘要:一、原理生物显微摄影(Microphotography)是利用摄影装置来拍摄显微镜视野中所观察到的物像。在生物医学方面,主要用于对正常细胞或病变细胞的显微形态学研究记录。3.物镜与目镜合理组合 依标本的不同和显微摄影要...
07-09-25摘要:一、微量全血培养(一)原理人体外周血中淋巴细胞是成熟的免疫细胞,正常情况下处于G。PHA(Phytohemagglutinin,植物血凝素)是人和其它动物淋巴细胞的有丝分裂刺激剂,它能使处于G0期的淋巴细胞转化为淋巴母细胞,进...
07-09-25摘要:一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同,在同一离心场内的沉降速度也不相同,根据这一原理,常用不同转速的离心法,将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆,在均匀的悬浮...
07-09-25摘要:细胞的组织化学方法,是研究细胞成分常用的方法之一。它是利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应,从而在细胞局部形成有色沉淀物,再通过显微镜对组织内的生物化学成分进行定性、定位、定量研究。一、Brach...
07-09-25摘要:一、三种细胞器的光镜切片 (一)高尔基复合体(Golgi Complex)用镀银法染色的豚鼠脊神经节光镜切片:神经细胞因合成运输大量的蛋白质而含有发达的内质网和高尔基复合体,在低倍镜下观察,神经节的假单极细胞体被神...
07-09-25摘要:一、成纤维细胞微丝的染色及其对细胞松驰素B的反应 (一)原理微丝普遍存在于多种细胞,对细胞的形状和运动有一定作用。细胞松驰素B可与微丝的亚单位肌动蛋白结合,从而破坏微丝,改变细胞的形状。 (二)细胞松驰素...
07-09-25摘要:一、蟾蜍胸骨剑突软骨细胞液泡系活体染色及观察 (一)原理在动物细胞内,凡是由膜所包围的小泡和液泡除线粒体外都属于液泡系,包括高尔基器、溶酶体、微体、消化泡、自噬小体、残体、胞饮液泡和吞噬泡,都是由一层...
07-09-25摘要:一、兔肝细胞线粒体的活体染色 (一)原理线粒体是细胞内一种重要细胞器,是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量,主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实...
07-09-25摘要:一、细胞的基本形态观察 (一)原理 细胞的形态结构与功能相关是很多细胞的共同特点,在分化程度较高的细胞更为明显,这种合理性是生物漫长进化过程所形成的。例如:具有收缩机能的肌细胞伸展为细长形。具有感受刺...
07-09-25摘要:但有人提出, 冻存后转化效率降低, 且这种方法不适合大质粒。以下为转贴,具体方法请最好查阅文献。coli感受态细胞制备方法:单菌落平板至2ml LB, 37 oC 250 r/m ovn, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0。
07-09-25摘要:下面的简单方案是Clhen等(1972)所用方法的变通方案,常用于成批制备感受态细菌,这些细菌可使每微克螺旋质粒DNA产生5x106-2x107个转化菌落,这样的转化效率足以满足所有在质粒中进行的常规克隆的需要。该方法...
07-09-25摘要:体外培养细胞缺乏抗感染能力,所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。若实验者粗心大意,技术操作不规范,也会导致污染。因而.为在一切操作中为最大可能的保证无菌.每一项工作都必须做到有条不紊和完全靠...
07-09-25摘要:一、原理在不加任何条件下直接冻存细胞时,细胞内和外环境中的水都会形成冰晶,能导致细胞内发生机械损伤、电解质升高、渗透压改变、脱水、PH改变、蛋白变性等,能引起细胞死亡。在缓慢的冻结条件下,能使细胞内水...
07-09-25摘要:一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其...
07-09-25摘要:一、原理体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期...
07-09-25摘要:一、原理 培养的细胞在一般条件下要求有一定的密度才能生长良好,所以要进行细胞计数。计数结果以每毫升细胞数表示。细胞计数的原理和方法与血细胞计数相同。在细胞群体中总有一些因各种原因而死亡的细胞,总细胞...
07-09-25摘要:体内组织细胞在体外培养时,所需培养环境基本相似,但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同,各自要求条件有一定差别,所采取的培养技术措施亦不尽相同,现介绍个别组织细胞培养的要点如下:一、上皮细胞...
07-09-25摘要:肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的...
07-09-25摘要:一、原理细胞在培养瓶长成致密单层后,已基本上饱和,为使细胞能继续生长,同时也将细胞数量扩大,就必须进行传代(再培养)。传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过...
07-09-25摘要:各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株,都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称,即文献中常称之为已鉴定的细胞(Certifi...
07-09-25摘要:一、体内、外细胞的差异和分化1、差异:细胞离体后,失去了神经体液的调节和细胞间的相互影响,生活在缺乏动态平衡的相对稳定环境中,日久天长,易发生如下变化:分化现象减弱。形态功能趋于单一化或生存一定时间...
07-09-25摘要:[实验目的]1了解细胞转染技术原理和基本方法2磷酸钙沉淀法的基本技术要点[实验原理]磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法,磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷...
07-09-25摘要:【实验目的】1.了解细胞电穿孔和电融合的基本原理2.学习电穿孔和电融合基本技术【实验原理】当细胞置于非常高的电场中,细胞膜就变得具有通透性,能让外界的分子扩散进细胞内,这一现象称为电穿孔。运用这一技术...
07-09-25摘要:大分子导入细胞技术外源核酸、多肽导入受体细胞的方法繁多,大致可分为三类:化学方法、物理化学方法和生物学方法。生物学方法中,目前主要是利用病毒作为外源核酸、多肽导入的工具,通过病毒感染将外源核酸、多肽...
07-09-25摘要:2 细胞冷冻管解冻培养时,是否应马上去除DMSO。 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞),在解冻之后,应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去...
07-09-25摘要:一、定性和定量研究只定性的研究方法:常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察(普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜)进行定量或半定量的研究方法:各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、E...
07-09-25